Mình mới đi làm, chạy sắc ký xác định Tetracycline. Hiện mình đang gặp vấn đề là peak của Tetracycline và Oxytetracycline bị kéo đuôi khá nhiều. Mình đã thay đổi pha động cho ra nhanh hơn nhưng không được (pha động gồm Acid Oxalic, Acetonenitril và Metanol). Ai có kinh nghiệm giúp mình với !!! Mình dùng máy HPLC của Agilent, đầu dò UV, ở 350nm
Thứ nhất hai pic tách khỏi nhau ? yên tâm vấn đền tách
- Cột của bạn C18 ? dài 15 cm ? hay bao nhiêu,
- Loại cột cỡ hạt nhỏ hay 5 um
- Pha động ACN / MeOH/ Nước tỷ lệ bao nhiêu, Oxalic nồng độ không quyết định nhiều
- Tốc độ dòng 1 ml/phút ? Bạn nên cho đầy đủ thông tin liên quan đến sự tách pic - hoặc bạn đang chạy theo bài báo, tiêu chuẩn đã xây dựng trước mà chưa đạt tối ưu ? Theo tôi 1 trong hai thành phần MeOH hoặc ACN là đủ, thay đổi tỷ lêh thành phần dung môi sẽ có các kết quả khác nhau, nồng độ TeT và Ote khoảng tuyến tính thế nào…từ đó tìm tối ưu…
Mình dùng cột C18 125mm, hạt 5um. Khi chạy với tốc độ dòng 1 mL/phút, pha động A.Oxalic:ACN:MeOH=600:300:100 thì peak tách tốt nhưng kéo đuôi khá nhiều. Mình đã tăng từ từ tỉ lệ của ACN và MeOH lên để ra nhanh hơn nhưng 2 peak bị dính nhau 1 chút và vẫn kéo đuôi (dù chạy ở nồng độ thấp hay cao- từ 0.05 ppm đến 1 ppm). Mình không biết tại sao, xin bạn chỉ giúp !!!
bạn có thể cho mình xin quy trình phân tích tetracyline không?
Gửi các bạn một số tài liệu ứng dụng xác định Tetracycline của Agilent để mọi người tham khảo.
Nếu các bạn cần thêm thông tin thì liên hệ với mình qua email nhé.
Thanks, Thế Anh nhtheanh@gmail.com
Bạn mrlove đang dùng hệ Agilent HPLC có model gì? Bạn cho mình thông tin liên hệ mình sẽ có kỹ sư ứng dụng liên hệ và tư vấn giúp bạn.
Thanks, Thế Anh nhtheanh@gmail.com
Mr LOVE , Hi Anh thử thay đổi pha động : dùng axit Oxalic và ACN xem. Nên chọn 1 trong hai ACN và MeOH thôi Khi làm LC càng giản tiện thành phần dung môi càng tốt, và nếu đẳng dòng đc nữa thì càng an toàn. như vậy độ lặp lại tốt hơn.