Bạn nào biết cho mình xin hỏi về thời gian lưu của một chất một tí. Thời lưu của một chất là không đổi cho dù mình thay đổi điều kiện chạy máy đúng không các bạn, dựa vào thời gian lưu người ta có thể định tính một chất phải không? Giúp mình với
Nói nôm na cho dễ hiểu thì thời gian lưu của một chất là thời gian chất đó chạy ra khỏi cột và vào tới đầu dò, trên sắc ký đồ thể hiện dưới dạng peak của nó (với điều kiện chọn đúng bước sóng và một vài thông số sắc ký) ở một vị trí nào đó trên trục thời gian.
Nói như vậy có nghĩa là nếu điều kiện chạy máy thay đổi, thời gian lưu cũng sẽ thay đổi theo. Một vài ví dụ thay đổi thời gian lưu như sau:
- Thay đổi vận tốc dòng, nếu chạy 1ml/min thì peak có RT=5 phút thì chạy 2ml/min, thời gian lưu giảm xuống còn khoảng 2.5 phút.
- Thay đổi pha động: nếu pha động tương thích thì thời gian lưu giảm.
- Không thay đổi gì cả, nhưng frit bị bẩn (theo thời gian), áp suất dòng sẽ tăng và có nhiều khả năng thời gian lưu sẽ tăng.
- …
Về câu hỏi thứ 2 của bạn thì câu trả lời là: phải. Dựa vào thời gian lưu, ta có thể định tính một chất, vì ta dùng chất chuẩn để so sánh và nhận dạng. Nếu RT của peak mẫu cho ra trùng với RT của peak chuẩn thì có thể kết luận tụi nó là cùng một chất.
Cho hỏi nếu như matrix của mẫu la ko biết dc, vậy chất chuẩn có thể sử dung dc ko ? nếu ko dc thì làm sao identify vậy ? cám ơn
Sắc ký chỉ dựa vào thời gian để định tính bởi vậy tính khẳng định thấp. Nếu bạn dùng dettector MS hoặc UV thì có thể dựa vào đó để tăng tính khẳng định. Một mẫu có matrix phức tạp thì cần phải có độ phân giải sắc ký cao thì các đầu dò trên mới hiệu quả.